技術文章
Technical articles(1)復制方法 將D-半乳糖用生理鹽水配制成50%注射液,常規滅菌后待用;復方托品酰胺滴眼劑供鏡檢前擴瞳用。用3周齡體重25g左右大鼠,經復方托品酰胺滴眼劑散瞳后,裂隙燈檢查晶狀體透明。造模大鼠均采用常規消毒,然后于頸背部每日經皮下按30ml/kg體重的劑量注射50%半乳糖,每天1次,連續30d。于次注射后第7, 14, 21, 30日分別以復方托品酰胺滴眼劑散瞳后用裂隙燈觀察晶狀體的動態變化。
(2)模型特點 注射D-半乳糖7d后,大鼠開始出現白內障早期改變,即晶狀體周邊皮質出現空泡;給藥14d、21d及30d后大鼠均出現不同程度的晶狀體渾濁。經皮下注射 D-半乳糖建立的白內障動物模型復制成功率高,模型復制成功率高,造模時間較短,實驗操作簡單,實驗經費耗費較少,本模型為進一步研究白內障發病機制、療效觀察以及相關藥物的篩選提供了較為理想的實驗平臺。
(3)比較醫學 應用D-半乳糖誘導而復制的白內障動物模型,其白內障形成的病理過程與臨床上人類糖尿病性白內障和老年性白內障相似,是目前得到*的一種較為理想的動物模型,已廣泛應用于糖尿病性白內障、老年性白內障的發病機制及藥物治療方面的研究。但采用本方法制作的動物模型對大鼠年齡、半乳糖誘導途徑、半乳糖的使用劑量要求較高。除了采用皮下注射方法外,也有研究采用在建立半乳糖性白內障模型過程中,用含半乳糖膳食喂養動物或給予動物飲糖水來復制動物模型,但此方法使大鼠白內障病變出現時間延緩,病情減輕,較為符合人類老年性白內障的發病規律,適用于進行白內障藥物治療方面的研究;或者通過動物腹腔注射半乳糖使口服半乳糖誘發白內障病變的成熟時間提早,適用于作白內障時混濁晶體測定方面的研究;此外尚有用球后注射半乳糖的方法來制作大鼠晶體混濁,但由于制作技術難度較高易造成眼部感染等缺陷,實用性較差。目前國內文獻半乳糖性白內障動物模型大多數采用腹腔注射方法,但研究發現腹腔注射D-半乳糖的3周齡幼鼠極易死亡,所以模型復制的成功率較低。其原因可能為腹腔注射時,注射針的針尖易傷及幼鼠臟器造成大鼠死亡;也可能與腹膜吸收半乳糖較快,使組織細胞處于高滲環境,引起組織細胞功能障礙從而導致動物死亡。因此,用皮下注射方法造模則可避免或減少動物傷亡,提高模型動物的存活率,模型復制成功率高。實踐中采用何種大鼠年齡的大鼠、糖劑量及誘導途徑應根據實驗需要而定,因為這些因素將直接關系到動物模型復制的成敗及應用。