技術(shù)文章
Technical articles1自發(fā)性腦梗死模型
高血壓動物可形成自發(fā)性腦梗死。常用的有原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓兩大類。前者以日本種的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)及其易卒中亞型(SHRsp)為常用,后者為各種腎性高血壓動物。這種腦梗死與人類的腦梗死發(fā)病情況為接近,是目前較為理想的動物模型之一,國內(nèi)主要的實驗動物研究機(jī)構(gòu)都有供應(yīng)。
2沙鼠大腦中動脈缺血模型
【操作步驟】成年沙鼠,10%水合氯醛(4ml/kg)腹腔麻醉,沿腹部中線于頸部切開。剝離出一側(cè)頸動脈,用銀制鉗夾夾閉。考慮實驗需要可實行長期夾閉或可再灌注。
【結(jié)果分析】由于沙鼠后交通動脈缺失,Willis環(huán)前后不連續(xù),故經(jīng)頸部夾閉一側(cè)總動脈可以方便地造成同側(cè)半球缺血,可依據(jù)沙鼠表現(xiàn)的體征,結(jié)合眼底觀察鏡觀察眼底缺血情況判別。
3急性大鼠大腦中動脈阻塞全腦缺血模型
【操作步驟】成年SD或Wistar大鼠,10%水合氯醛(4ml/kg體重)麻醉。右側(cè)臥位,在左眼外緣到左外耳道連線的中點(diǎn),垂直于連線切開皮膚約2cm,沿顴弓和下頜骨,用文氏鉗將手術(shù)面撐大,暴露鱗狀骨的大部分,用牙科鉆在顴骨前聯(lián)合前內(nèi)2cm處鉆孔開顱。在手術(shù)顯微鏡下切開硬腦膜,暴露出大腦中動脈,分離出中動脈周圍的軟腦膜和蛛網(wǎng)膜,使中動脈游離。用雙電極(電壓12V)電灼損毀Willis環(huán)起始部至嗅溝段的大腦中動脈,使之阻塞。為防止電極的電流對腦組織造成電損傷,在操作過程中不斷向中動脈周圍滴加生理鹽水,并盡量縮短操作時間。創(chuàng)面覆蓋一小塊明膠后,縫合肌肉和皮膚。
【結(jié)果分析】大腦中動脈從Willis環(huán)發(fā)出后向外跨過嗅束蜿蜒走行于大腦的外側(cè)面,供應(yīng)大部分的大腦半球,大腦中動脈在 Willis環(huán)起始到嗅溝區(qū)發(fā)出許多的分支,供應(yīng)豆殼復(fù)合體,所以電灼此段大腦中動脈的主干血流,復(fù)制中風(fēng)模型的成功率較高。用本實驗手術(shù)方法復(fù)制的大鼠中風(fēng)模型的成功率較高,死亡率低,較為理想,有面積不等的梗死區(qū)出現(xiàn),行為障礙約占90%。由于手術(shù)部切斷顴弓,術(shù)后基本不影響動物的采食行為,并可以進(jìn)行長期的觀察,有利于建立慢性中風(fēng)動物模型。
4腎性高血壓引起的SD大鼠腦血管病變模型
【操作步驟】成年SD大鼠,3%的戊丨巴丨比丨妥丨鈉(30mg/kg)腹腔麻醉。無菌條件下,在大鼠下腹腔沿腹中線偏左做2cm切口,沿腹壁向下摸索,暴露出雙側(cè)腎臟。分別用不同內(nèi)徑的銀制鉗夾夾閉左右雙腎或右腎動脈。雙腎結(jié)扎動脈夾的內(nèi)徑分別為0.2mm、0.3mm,單腎結(jié)扎內(nèi)徑為0.2~0.25mm。
【結(jié)果分析】在高血壓形成后約3周,海馬腳(CA)和腦內(nèi)小動脈通透性開始增高,這種急性期是以后的慢性腦血管病的基礎(chǔ)。高血壓持續(xù)4個月以上的腎性高血壓(RHR),其腦表面大腦中動脈(MCA)與大腦前動脈(ACA)及大腦后動脈(PCA)之間的血管明顯少于正常血壓鼠。在此情況下,一旦腦血管血流減少,灌注壓減小,由于毛細(xì)血管和小動脈數(shù)量減少、分布稀疏、血管儲備能力下降,腦缺血和腦梗死的幾率就會增加。