細(xì)胞劃痕實驗

產(chǎn)品簡介

細(xì)胞劃痕實驗是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是，當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕“。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕“愈合。

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更新時間：2023-08-28

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細(xì)胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細(xì)胞運動的方法，實驗成本低，可以用來檢測貼壁生長腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

細(xì)胞劃痕實驗是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是，當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕"。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕"愈合。

基本步驟：“劃痕"的制造，細(xì)胞遷移期間圖像的獲得以及后期數(shù)據(jù)的處理。

步驟	一.準(zhǔn)備：能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）二.流程： 1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。 2.在空中加入約5X10⁵個細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過12小時能鋪滿。 3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。 4.用PBS洗細(xì)胞3次，去處劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。 5.放入37度5%CO₂培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6，12，24小時取樣，拍照。

步驟

一.準(zhǔn)備：
能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）

二.流程：
1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X10⁵個細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過12小時能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次，去處劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO₂培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6，12，24小時取樣，拍照。

特點：1，在程度上模擬了體內(nèi)細(xì)胞遷移的過程。
2, 非常適合研究細(xì)胞與胞外基質(zhì)（ECM），細(xì)胞與細(xì)胞之間相互作用引起的細(xì)胞遷移。
3，與包括活細(xì)胞成像在內(nèi)的顯微鏡系統(tǒng)兼容，可用于分析細(xì)胞間的相互作用。
4，研究細(xì)胞遷移的體外實驗中簡單的方法。

傳統(tǒng)方法：細(xì)胞融合后，用槍頭在細(xì)胞層表面制造劃痕
方法缺陷：人工制造的“劃痕"很難*性，重復(fù)性差。