技術文章
Technical articles(1)復制方法4周齡的雌性大鼠,散瞳后裂隙燈檢查,排除角膜病、葡萄膜疾病、晶狀體及玻璃體疾病。按3ml/kg體重的劑量經腹腔注射10%水合氯醛溶液致全身麻醉,動物規定于操作臺后,用20g小球從20cm高度落下打擊大鼠的左眼,每周1次,每次100下,進行數周。(2)模型特點第1次打擊3d后,大鼠實驗眼可見晶狀體前囊出現散在點狀及片狀混濁,中央瞳孔區環狀混濁。第6日時晶狀體前囊散在片狀混濁已消失,而晶狀體前囊近中央瞳孔區環狀及樹枝狀混濁則無明顯改變。反復打擊(第2~5次),晶狀體...
(1)復制方法取體重為25g左右出生12d齡幼年大鼠,按0.26ml/kg體重的劑量經大鼠腹腔注射0.1%亞丨硒丨酸丨鈉溶液,一次注射即可使大鼠發生白內障。(2)模型特點動物造型后5d其晶狀體核即混濁,至30d時模型動物晶狀體核仍混濁。模型動物一次性腹腔注射0.1%亞丨硒丨酸丨鈉溶液3~5d,即可迅速造成嚴重的核性白內障,采取本方法復制的模型比糖性白內障動物模型形成的速度(1~2個月)要快得多,本模型復制方法簡單,耗費低廉,重復性好。(3)比較醫學長期缺硒的兔晶體和肝臟中谷胱...
顧名思義,腫瘤動物模型構建這種模型的建立是將腫瘤細胞或腫瘤組織直接種植在小鼠的皮下。種植的點也有講究,一般選擇血運淋巴回流豐富的腹股溝和腋窩。可根據實驗設計選擇移植點,統一移植點的位置,除了遵守實驗統一的條件外,待腫瘤成熟后收集腫瘤時留下照片證據也顯得美觀。根據腫瘤動物模型構建方法或者來源分為三大類1、自發性腫瘤動物模型優點:發病機制及機理較接近人。缺點:數量及種類非常有限,無法滿足實驗的需要。2、誘發性腫瘤動物模型優點:發病機制及機理也較接近人。缺點:誘發劑對人體都有很大的...
小鼠生化位點檢測乙酸纖維薄膜電泳是生物化學的方法,該技術運用于實驗動物遺傳質量控制只有二十余年的歷史。由于該方法能檢查近20對等位基因,涉及十幾條染色體,利于反映被檢品系的遺傳概貌,所以,目前認為此法靈敏度高,準確性強,檢出速度快,用樣量小,是遺傳檢測諸方法中較為理想的一種。一、實驗器材1.樣品(1)血清:用于Es-1和Trf兩位點檢查。(2)溶血清:用于檢查Hbb、Car-2和Ldr-1位點。(3)腎勻漿:用于檢查Es-2、Es-3、Idh-1、Mod-1、Akp-1、Pg...
免疫學檢測方法與免疫技術免疫學檢驗方法和免疫化學技術主要包括:抗原抗體的制備、純化和鑒定,免疫擴散、免疫電泳、免疫凝集試驗、補體結合試驗,免疫細胞分離、純化和鑒定,免疫功能檢測,細胞因子檢測,放射免疫檢測,免疫酶標檢測,熒光和發光免疫技術,免疫組化實驗方法,原位雜交免疫組化,免疫PCR技術,免疫微球的應用,免疫電鏡技術,細胞凋亡的檢測方法,膜受體分析,胞內鈣鎂濃度的測定和細胞間通訊,流氏細胞儀技術及應用等。從上述內容可以看出,免疫技術是免疫學和物理、化學及電子信息和分子生物學...
構建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數檢測方法目的:建立基于競爭性聚合酶鏈式反應(competitivepolymerasechainreaction,cPCR)小鼠基因拷貝數變異(copynumbervariations,CNVs)的檢測方法,用于檢測野生小家鼠來源一號染色體替換系群體(populationofspecificchromosome1substitutionstrains,PCSSs)的CNVs。方法:選取小鼠一號染色體上11個CNVs位點,及7、9和X染色...
ELISA:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵...
ELASA:用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各...